Bouin's波恩氏固定液

【產(chǎn)品組成】

Bouin's波恩氏固定液，主要由飽和PA、甲醛、乙酸混合而成。

【保存條件】

室溫，24個(gè)月

【產(chǎn)品概述】

固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu)，固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。固定劑通過(guò)凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而使酶失活。固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等，較常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。

Bouin's固定液(Bouin's Fluid)主要由飽和PA、甲醛、乙酸混合而成，PA可沉淀蛋白引起組織收縮，但不會(huì)使組織硬化,其與甲醛和乙酸混合后，穿透速度加快，固定均勻，組織收縮輕微，對(duì)細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)顯示的很清晰，為一種良好的固定液。尤其對(duì)Masson三色法等的結(jié)締組織和肌纖維染色有媒染作用，經(jīng)其固定后的組織著色鮮艷。該固定液也可能軟化皮膚和肌腱，以利于切片。

【用途】

活檢標(biāo)本的固定、媒染劑、適用于脂肪較多的組織標(biāo)本。浮游生物及其他生物組織的固定，用于保存和觀察。

【產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)】

用波恩氏溶液固定藻類的優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞變化小，有利于種的鑒定和觀察，特別對(duì)固定浮游藻類的效果較佳。

【使用方法】

1、一般僅需固定30～60min。如果組織塊大，可適當(dāng)延長(zhǎng)固定時(shí)間，但不宜超過(guò)24h。

2、用Bouin's固定液固定后，組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉(zhuǎn)入70%的乙醇脫水，經(jīng)乙醇脫水時(shí)可除去大部分PA，組織留有一點(diǎn)黃色，對(duì)染色也無(wú)影響。

【注意事項(xiàng)】

1、Bouin's固定液對(duì)人體有一定的損害，請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)好的環(huán)境下小心操作，避免吸入。

2、組織取材的厚度不同，固定時(shí)間也不同，對(duì)組織恰當(dāng)?shù)倪x材有利于固定液的滲透。常規(guī)活檢組織比較適合的厚度為2～4mm，一般不超過(guò)6mm。

3、固定液的容量應(yīng)足夠，一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于10:1。如果容積不夠大，可以在固定期間更換1～3次固定液。

4、溫度對(duì)固定的影響很明顯，提高溫度可以加速固定作用，但溫度不宜過(guò)高。

5、取出新鮮組織后，應(yīng)及時(shí)固定，無(wú)法及時(shí)固定時(shí)，應(yīng)保存于生理鹽水中及時(shí)送檢。

骨穿標(biāo)本固定及脫鈣操作流程

1. 骨髓標(biāo)本取出后，立即 Bouin 氏固定液固定，固定過(guò)夜。

2. 標(biāo)本從固定液取出以后，放入 EDTA 脫鈣液，脫鈣液體積 5 倍于骨穿標(biāo)本，脫鈣

4-5 小時(shí)。

3. 脫鈣后，流水沖洗 15 分鐘，包好后，常規(guī)脫水、制片?？梢员ＷC得到滿意的免疫組化

實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

注：骨髓標(biāo)本 Bouin 氏固定液固定的優(yōu)點(diǎn)，HE 染色后，易于區(qū)分原紅和原粒

原紅：核均勻致密，蘇木素染核，染色較深。

原粒：核不均勻，呈大小不一顆粒狀，核染色相對(duì)較淡。