CV15-Zero Background pTOPO-TA Simple Cloning Kit （零背景TA克隆，不含多克隆酶切位點(diǎn)MCS)

產(chǎn)品介紹：

       本制品和傳統(tǒng)的T4連接酶原理不同，它利用了Topoisomerase可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）、高效（接近100%）連接DNA片段的原理采用本公司獨(dú)創(chuàng)的工藝制成。 

1. 可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）完成A末端PCR產(chǎn)物連接。 

2. 特制的新型載體質(zhì)粒大小僅僅不到2kb，充分發(fā)揮了TOPO載體越小，可容納片段越大的優(yōu)勢(shì)，最大限度提高了大片段連接效率；連接后質(zhì)粒大小比傳統(tǒng)載體小2kb以上，質(zhì)粒越小，轉(zhuǎn)化效率越高，極大的提高了各種片段連接后的轉(zhuǎn)化子數(shù)量。 

3. 采用氨芐抗性載體只需10分鐘復(fù)蘇時(shí)間，比卡那抗性載體1小時(shí)復(fù)蘇時(shí)間縮短6倍。 

4. 最快可以不用冰浴和熱休克，室溫5分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)化；無(wú)需1小時(shí)復(fù)蘇，只需37℃10分鐘復(fù)蘇便可以涂板。從連接到涂板最快只需15-20分鐘。

5. 自殺基因零背景原理，無(wú)自連假陽(yáng)性，無(wú)需繁瑣藍(lán)白斑篩選和菌落PCR篩選。大部分情況下隨機(jī)挑一個(gè)克隆便是有插入的（接近100%）。

6. 連接長(zhǎng)片段能力遠(yuǎn)超傳統(tǒng)TA克隆載體，可連接長(zhǎng)達(dá)10kb片段（例如連接5kb片段，也可能達(dá)到挑10個(gè)菌落，至少8個(gè)是有插入的效果），是新一代世界領(lǐng)先的簡(jiǎn)單、快速、零背景免篩選的TOPO TA克隆載體。

本制品在克隆插入位點(diǎn)兩側(cè)不含多克隆酶切位點(diǎn)（Simple），需要時(shí)可在PCR擴(kuò)增引物上導(dǎo)入合適的酶切位點(diǎn)。此時(shí)如果使用PCR擴(kuò)增引物導(dǎo)入的酶切位點(diǎn)進(jìn)行酶切時(shí)，酶切反應(yīng)將不會(huì)受到載體上其它多克隆酶切位點(diǎn)影響，可大大提高酶切效率，增加亞克隆成功率。

注：本TOPO載體連接體系是按照10ml計(jì)算可以用20次，如果按照其它公司產(chǎn)品5ml計(jì)算，實(shí)際使用次數(shù)可以增加一倍，20次實(shí)際可用40次。 

使用該產(chǎn)品發(fā)表的部分文章：

CV15 Zero Background pTOPO-Blunt Cloning Kit: 

1. Detection and genetic diversity analysis of Prunus necrotic ringspot virus in West Liaoning. ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA 2017, 4Y(1):15-25

2. A 23-Nucleotide Deletion in STK11 Gene Causes Peutz–Jeghers Syndrome and Malignancy in a Chinese Patient Without a Positive Family History. Digestive Diseases and Sciences 2017, 62(11): 3014–3020

3. A novel mutation (c.855delG) in STK11 gene is associated with Peutz–Jeghers syndrome in a Chinese family. Digestive and Liver Disease 2018, 50(3) DOI: 10.1016/j.dld.2017.12.007